Análise molecular e filogenética do gene hisA para a identificação de linhagens do complexo Burkholderia cepacia isoladas de uma indústria farmacêutica

Resumo

As bactérias pertencentes ao Complexo Burkholderia cepacia (CBc) representam um importante desafio para a indústria farmacêutica, devido à sua capacidade de sobreviver em diferentes ambientes, principalmente em meios aquosos. Métodos aplicados em laboratórios de controle microbiológico na indústria farmacêutica, como caracterização bioquímica, MALDI-TOF MS e o sequenciamento do gene 16S rRNA, não são capazes de diferenciar as espécies do CBc, em função da proximidade fenotípica e genética entre elas. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar um protocolo de amplificação e sequenciamento do gene hisA para identificar linhagens previamente classificadas como pertencentes ao CBc. Foram analisadas 38 linhagens provenientes de uma indústria produtora de imunobiológicos localizada no estado do Rio de Janeiro. Após sequenciamento pelo método de Sanger, as sequências obtidas foram analisadas através da ferramenta Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) do National Center for Biotechnology Information (NCBI) e, em seguida, foi construída uma árvore filogenética de máxima verossimilhança. A análise das sequências resultou na identificação de 29 (76,3 %) linhagens como Burkholderia contaminans e oito (21,1 %) com confiança em nível de gênero, mas intimamente relacionada a espécie B. contaminans. Uma (2,6 %) linhagem não pôde ser identificada com a técnica avaliada, o que foi corroborado pela análise filogenética. Conclui-se que o sequenciamento do gene hisA foi eficaz para identificação da maioria das linhagens em nível de espécie, demonstrando seu potencial como ferramenta complementar para a caracterização de isolados desse complexo em laboratórios de controle microbiológico.